大肠杆菌质粒的提取

一:大肠杆菌提取的质粒有哪三种构型

在琼脂糖凝胶电泳中存在三条电泳条带,按照Marker的位置从大到小依次为:线性DNA,松散的环状DNA,超螺旋结构DNA(在松散环状DNA的基础上进一步盘曲折叠形成的紧致的环状DNA)

其实这三种结构分子量相同,由于空间结构的差异导致在琼脂糖凝胶电泳中迁移率不同,因此出现三条条带。

标准的质粒提取实验中只存在后两种结构,线性DNA是由于提取操作过于剧烈或缓冲溶液pH不适宜造成的DNA断裂。过于震荡可造成电泳条带拖尾现象。

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